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022-66387942支原體是目前為止發(fā)現(xiàn)的最小的原核生物,支原體污染一般在顯微鏡下不可見(jiàn),很難察覺(jué),但細(xì)胞會(huì)受到極大的損傷,主要通過(guò)以下途徑影響細(xì)胞生長(zhǎng)及功能。那么細(xì)胞被支原體污染,該怎么辦呢?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、支原體污染的來(lái)源
1. 環(huán)境污染:如細(xì)胞培養(yǎng)房、細(xì)胞培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)內(nèi)已被支原體污染;
2. 實(shí)驗(yàn)器材的污染:移液槍、移液管、細(xì)胞培養(yǎng)皿、水浴鍋等;
3. 細(xì)胞培養(yǎng)試劑的污染:培養(yǎng)基、胰酶、血清、細(xì)胞凍存液等;
二、處理方法
1. 及時(shí)更換培養(yǎng)液:可以減緩支原體的污染,但不能wan全清除;
2. 使用抗生素類(lèi)去除試劑:抗生素對(duì)支原體有較好的抑制作用,可以有效清除支原體,但長(zhǎng)時(shí)間使用抗生素,會(huì)產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)。在使用單一抗生素清除效果不佳時(shí),可以考慮更換抗生素或者采用復(fù)合型抗生素試劑;
3. 使用非抗生素去除試劑:非抗生素清除試劑不會(huì)產(chǎn)生耐藥性,對(duì)支原體的清除效果可以達(dá)到100%,且?guī)缀鯇?duì)細(xì)胞沒(méi)有影響,是去除支原體的shou選試劑。
4. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔:發(fā)生支原體污染后,應(yīng)及時(shí)處理已被污染的細(xì)胞,并對(duì)細(xì)胞房進(jìn)行che底的清潔和消殺,防止交叉污染。
三、預(yù)防方法
1. 定期消毒:定期對(duì)細(xì)胞房、實(shí)驗(yàn)服、移液槍、細(xì)胞培養(yǎng)箱等進(jìn)行消毒,及時(shí)清除支原體;
2. 檢查細(xì)胞培養(yǎng)試劑:選擇來(lái)源可靠的試劑及耗材產(chǎn)品,在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)操作之前,檢查細(xì)胞培養(yǎng)基、血清、胰酶等試劑,可選擇合適孔徑的濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌,使用過(guò)程中如發(fā)現(xiàn)有污染應(yīng)及時(shí)更換;
3. 規(guī)范細(xì)胞培養(yǎng)操作:建立良好的細(xì)胞培養(yǎng)操作SOP,遵循無(wú)菌操作原則,規(guī)范穿戴實(shí)驗(yàn)服、口罩、手套等,并在細(xì)胞培養(yǎng)開(kāi)始時(shí)進(jìn)行消毒;規(guī)范處理實(shí)驗(yàn)廢棄物;
4. 在培養(yǎng)基中加入支原體預(yù)防試劑:
加入抑制支原體DNA合成的抗生素:例如氟喹諾酮類(lèi)抗生素;
加入抑制支原體蛋白質(zhì)合成的抗生素:例如大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、四環(huán)素、雙萜烯類(lèi)等抗生素;
加入非抗生素類(lèi)支原體清除試劑:如膜活性多肽,通過(guò)與支原體膜特異性結(jié)合che底清除支原體。
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