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022-66387942免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)是基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色來(lái)對(duì)組織內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性、定量的一項(xiàng)技術(shù)。那么你知道免疫組化實(shí)驗(yàn)的分類(lèi)與應(yīng)用嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、分類(lèi)
根據(jù)抗體標(biāo)記物的不同一般分為免疫酶標(biāo)法、免疫熒光法、親和組織化學(xué)法、免疫鐵蛋白法、免疫金法、放射免疫自影法。下面介紹兩種較為常用的兩種技術(shù):
(1)免疫熒光法
免疫熒光法是最早建立的免疫組織學(xué)技術(shù)。將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針,檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而對(duì)組織中的抗原進(jìn)行定位或定量。
(2)免疫酶標(biāo)法
免疫酶標(biāo)法是繼免疫熒光之后發(fā)展的應(yīng)用較為廣泛的免疫組化技術(shù)。先以酶標(biāo)記的抗體作用于組織或細(xì)胞,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性物質(zhì)或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)其進(jìn)行定位,從而對(duì)細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位或定性研究的一種方法。
二、應(yīng)用
IHC的原理是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原,對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。人體內(nèi)很多器官和組織內(nèi)的組成細(xì)胞,由于起源一致,在形態(tài)結(jié)構(gòu)上非常相似,很多時(shí)候是很難靠形態(tài)來(lái)區(qū)分。在過(guò)去沒(méi)有免疫組化的情況下,識(shí)別有很強(qiáng)的主觀(guān)性,錯(cuò)誤難以避免。免疫組化就像細(xì)胞的“血型"鑒定,靠它可以明確組織來(lái)源。由于免疫組化具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、定位準(zhǔn)確等特點(diǎn),且能將形態(tài)研究與功能研究有機(jī)結(jié)合在一起,所以這門(mén)新技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的許多領(lǐng)域。免疫組化在病理學(xué)診斷中的應(yīng)用主要包括:
(1)確定細(xì)胞類(lèi)型
(2)辨認(rèn)細(xì)胞產(chǎn)物
(3)了解分化程度
(4)鑒定病變性質(zhì)
(5)探討腫瘤起源或分化表型
(6)確定腫瘤分期等
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