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qPCR擴(kuò)增過程中，擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時的所對應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)（CycleThreshold）。C代表Cycle，T代表Threshold。簡單講，Ct值就是qPCR中起始模板擴(kuò)增達(dá)到一定產(chǎn)物量時，所對應(yīng)的循環(huán)數(shù)。那么你知道qPCR實(shí)驗(yàn)中的Ct值有什么作用嗎？讓我們一起來看看吧！一、指數(shù)擴(kuò)增、模板量與Ct值的關(guān)系理想情況下，qPCR中的基因經(jīng)過一定的循環(huán)數(shù)被指數(shù)擴(kuò)增而積累，擴(kuò)增循環(huán)數(shù)和產(chǎn)物量之間的關(guān)系是：擴(kuò)增產(chǎn)物量=起始模板量×（1+En）循環(huán)個數(shù)。然而qPC...

病毒轉(zhuǎn)染是指將外源病毒導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)，用病毒將帶有目的基因的載體整合到細(xì)胞的基因組中，以達(dá)到長期穩(wěn)定表達(dá)目的基因的目的。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。那么病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)有何注意事項(xiàng)呢？讓我們一起來看看吧！一、病毒安全性問題病毒本身具有一定的危險性，需要在符合生物安全實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并遵守相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)范。病毒操作時最好使用生物安全柜。如果使用普通超凈工作臺操作病毒，請不要打開排風(fēng)扇。病毒操作時...

電轉(zhuǎn)，也稱電穿孔法，是通過脈沖電流在細(xì)胞膜上打孔，將外源分子（DNA、RNA、mRNA等）導(dǎo)入真核細(xì)胞內(nèi)，來改變細(xì)胞的特性，從而達(dá)到改造細(xì)胞的目的，是實(shí)現(xiàn)細(xì)胞基因功能和蛋白質(zhì)表達(dá)研究的重要工具。那么該如何提高電轉(zhuǎn)效率呢？讓我們一起來看看吧！一、細(xì)胞收集時：1)在消化貼壁細(xì)胞時，一定要注意終止胰酶反應(yīng)，防止過度消化；最好使用專業(yè)的胰酶中和劑；2)在進(jìn)行細(xì)胞離心時，使用低轉(zhuǎn)速長時間離心，提升細(xì)胞的存活率；3)選擇合適狀態(tài)的細(xì)胞，一般原代細(xì)胞可以傳1-2次后使用；盡量挑選迭代次數(shù)少...

細(xì)胞培養(yǎng)有兩種基本方式，一種是人工基質(zhì)上的單層細(xì)胞（貼壁培養(yǎng)），另一種是在培養(yǎng)基中自由漂?。☉腋∨囵B(yǎng)）。那么你知道貼壁細(xì)胞培養(yǎng)和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么嗎？讓我們一起來看看吧！來自脊椎動物的大多數(shù)細(xì)胞，除了造血細(xì)胞系和少數(shù)其他細(xì)胞系，都是貼壁依賴性的，必須在經(jīng)過專門處理以允許細(xì)胞粘附和擴(kuò)散的合適基質(zhì)上培養(yǎng)。然而，許多細(xì)胞系也適用于懸浮培養(yǎng)。同樣，大多數(shù)市售昆蟲細(xì)胞系在貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)中生長良好。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可以保存在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中，但隨著培養(yǎng)體積與表面積的增加...

你知道什么是原代細(xì)胞培養(yǎng)，和細(xì)胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細(xì)胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首ci培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時間短，遺傳性狀和體內(nèi)細(xì)胞相似，適于做細(xì)胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。最chang用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。二、細(xì)胞生長曲線細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)...