流式細(xì)胞分選抗體是種常用的細(xì)胞分選技術(shù)，可以用于分離和純化復(fù)雜細(xì)胞混合物中的不同細(xì)胞亞群。FACS主要基于流式細(xì)胞儀和細(xì)胞表面標(biāo)記的抗體，通過(guò)細(xì)胞的免疫反應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)分選。
 

　　1.抗體選擇：抗體可以特異性地結(jié)合目標(biāo)細(xì)胞表面的分子，如受體、細(xì)胞表面蛋白等。選擇抗體需要考慮到其特異性、親和性以及是否適用于實(shí)驗(yàn)條件。
 

　　2.標(biāo)記抗體：為了識(shí)別目標(biāo)細(xì)胞，選擇的抗體需要標(biāo)記上可檢測(cè)物質(zhì)，如熒光染料。常用的標(biāo)記物質(zhì)包括熒光染料、酶等。標(biāo)記抗體的選擇需要確保標(biāo)記物可以被流式細(xì)胞儀識(shí)別和檢測(cè)。
 

　　3.標(biāo)記細(xì)胞：將抗體標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞與其他細(xì)胞混合，形成細(xì)胞懸浮液。通過(guò)孵育，讓抗體與細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合，將目標(biāo)細(xì)胞與其他細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。
 

　　4.單細(xì)胞懸?。簩?biāo)記后的細(xì)胞懸浮液通過(guò)微細(xì)孔篩網(wǎng)，使得細(xì)胞以單個(gè)細(xì)胞的形式懸浮在懸浮液中。這樣能夠確保每個(gè)細(xì)胞的獨(dú)立性，使其能夠由流式細(xì)胞儀在分選過(guò)程中被準(zhǔn)確檢測(cè)。
 

　　5.流式細(xì)胞儀檢測(cè)：將單個(gè)細(xì)胞懸浮液通過(guò)流式細(xì)胞儀，儀器會(huì)以較高的速度將細(xì)胞一個(gè)接一個(gè)地通過(guò)光束，同時(shí)檢測(cè)每個(gè)細(xì)胞的熒光信號(hào)。根據(jù)抗體標(biāo)記的熒光信號(hào)的不同，可以確定細(xì)胞的類型和特征。
 

　　6.細(xì)胞分選：根據(jù)流式細(xì)胞儀檢測(cè)到的熒光信號(hào)，將目標(biāo)細(xì)胞與非目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分和分選。流式細(xì)胞分選通常根據(jù)熒光信號(hào)的強(qiáng)度來(lái)判斷細(xì)胞是否為目標(biāo)細(xì)胞，并根據(jù)設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞的篩選、分選和分離。
 

　　7.細(xì)胞收集：經(jīng)過(guò)分選后，目標(biāo)細(xì)胞會(huì)被分離和純化。通常是通過(guò)對(duì)視野內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步分選和收集，可以使用電場(chǎng)、壓力等手段對(duì)細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步分選和排列。
 

　　總結(jié)起來(lái)，流式細(xì)胞分選抗體原理主要包括抗體選擇、抗體標(biāo)記、標(biāo)記細(xì)胞、單細(xì)胞懸浮、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、細(xì)胞分選和細(xì)胞收集等步驟。這些步驟的協(xié)同作用可以選拔出特定目標(biāo)細(xì)胞并實(shí)現(xiàn)高純度的細(xì)胞分選。