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022-66387942Elabscience乙醛脫氫酶(ALDH)比色法測試盒適用于檢測動(dòng)物組織、血清(漿)等樣本中乙醛脫氫酶(ALDH)的活力。
檢測原理:
酒精代謝的主要途徑是乙醇脫氫酶(ADH)氧化成乙醛,然后是 NADH 依賴的乙醛脫氫酶(ALDH)氧化成乙酸。本試劑盒檢測原理是底物在乙醛脫氫酶的作用下,將 NAD+轉(zhuǎn)化為NADH,NADH在電子耦合劑的作用下使WST-8 顯橙黃色,通過測定450 nm下吸光值變化可測得乙醛脫氫酶活性。
樣本準(zhǔn)備:
① 樣本處理
血清(漿)樣本:直接測定。組織樣本:組織樣本使用生理鹽水(0.9% NaCl)勻漿處理。離心后取上清進(jìn)行測定,部分上清樣本用于蛋白濃度測定。
② 樣本的稀釋
在正式檢測前,需選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本稀釋成不同濃度進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,結(jié)合本試劑盒的線性范圍:0.01–10.0 U/L。
操作步驟:
① 標(biāo)準(zhǔn)孔:取20μL 不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入相應(yīng)的酶標(biāo)孔中。
測定孔:取20μL 待測樣本加入測定孔中。
② 向步驟①中各孔依次加入160μL 反應(yīng)工作液。
③ 向步驟②中各孔依次加入20μL 試劑四。
④ 振板3 s,室溫避光靜置5 min,酶標(biāo)儀450 nm下檢測各測定孔初始OD值 A1。
⑤ 37°C下避光孵育反應(yīng)45 min。
⑥ 酶標(biāo)儀于 450 nm 波長檢測各測定孔OD值A(chǔ)2和各標(biāo)準(zhǔn)孔OD值,計(jì)算測定孔變化 OD 值△A (注:△A = A2- A1,標(biāo)準(zhǔn)孔只需要檢測A2值)。
產(chǎn)品選購:
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
E-BC-K565-M | 乙醛脫氫酶(ALDH)比色法測試盒 | 48T(32 samples) |
96T(80 samples) |