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022-66387942碧云天總SOD活性檢測(cè)試劑盒(S0101S)
產(chǎn)品介紹:
碧云天的總SOD活性檢測(cè)試劑盒(WST-8法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應(yīng),通過(guò)比色來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物陰離子發(fā)生歧化作用,生成過(guò)氧化氫(H2O2)和氧氣(O2),是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。
目前有多種SOD活性測(cè)定法,其中NBT(氮藍(lán)四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差,易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率達(dá)不到100%等,從而使檢測(cè)的靈敏度和精確度受到影響;細(xì)胞色素C法也是一種常用來(lái)檢測(cè)SOD活性的方法,但細(xì)胞色素C其氧化活性高,易受樣品中的還原劑干擾,另外該方法需要連續(xù)測(cè)定吸光度值,對(duì)于SOD的檢測(cè)靈敏度比較低,并且不太適合大批量樣本的檢測(cè)。
目前測(cè)定SOD比較先進(jìn)的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測(cè)定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的WST-8法,可以檢測(cè)出低達(dá)0.5U/ml的超氧化物歧化酶。WST-8法的原理參考圖1,WST-8可以和黃嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子(O2.-)反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan dye),由于SOD能催化超氧化物陰離子發(fā)生歧化作用,所以該反應(yīng)步驟可以被SOD所抑制,因此SOD的活性與甲臜染料的生成量成負(fù)相關(guān),從而通過(guò)對(duì)WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計(jì)算SOD的酶活力。
圖1. 基于黃嘌呤氧化酶偶聯(lián)反應(yīng)體系和WST-8的SOD酶活力檢測(cè)原理圖。XO:xanthine oxidase
WST-8的反應(yīng)產(chǎn)物是穩(wěn)定的水溶性產(chǎn)物,可以通過(guò)單個(gè)時(shí)間點(diǎn)的吸光度檢測(cè)來(lái)測(cè)定SOD活力,適合高通量篩選研究。同時(shí)WST-8法測(cè)定SOD酶活力時(shí),最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常見(jiàn)的干擾因素的干擾,使檢測(cè)效果比其它的一些常見(jiàn)方法顯著改善。
本試劑盒的性能優(yōu)于同類產(chǎn)品總SOD活性檢測(cè)試劑盒(NBT法)。本產(chǎn)品的用途與同類產(chǎn)品總SOD活性檢測(cè)試劑盒(NBT法)相同,等量SOD導(dǎo)致的吸光度變化值顯著大于NBT法,線性范圍更寬。本試劑盒提供的SOD樣品制備液能直接裂解細(xì)胞,無(wú)需勻漿,操作更加便捷。
本試劑盒的檢測(cè)不受樣品中過(guò)氧化氫的干擾。很多細(xì)胞和組織樣品中含有內(nèi)源性的過(guò)氧化氫,會(huì)干擾SOD的檢測(cè)。本試劑盒通過(guò)添加適量過(guò)氧化氫酶等特殊方法,能有效去除常規(guī)樣品中過(guò)氧化氫的干擾。例如,對(duì)于SOD標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè),標(biāo)準(zhǔn)品中添加高達(dá)0.1mM的過(guò)氧化氫時(shí),對(duì)于檢測(cè)結(jié)果仍無(wú)顯著影響。
本試劑盒可以檢測(cè)細(xì)胞或組織勻漿液上清、全血、紅細(xì)胞抽提物、血清等生物樣品中的SOD活性。
產(chǎn)品屬性:
保存條件:-20℃保存,半年有效。S0101-3 WST-8需避光保存。
產(chǎn)品訂購(gòu):
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
S0101S | 總SOD活性檢測(cè)試劑盒 | 100次 |