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022-66387942酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技術(shù)從1970年代發(fā)展至今已近半個世紀(jì),是一項實驗室最基本的免疫檢測技術(shù),被廣泛的應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗。那么面對市面上數(shù)以千計的試劑盒,數(shù)百家供應(yīng)商,該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢?讓我們一起來看看吧!
一、明確研究種屬
一般來說,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬,且為shou個單詞,檢索種屬的常用語言為英文。
如果您需對不同物種的同一因子進行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個種屬的 ELISA 試劑盒,產(chǎn)品介紹中會注明「Multi-species」。
二、明確樣本類型
不同廠家驗證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本,根據(jù)樣本處理方式的差異,分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購買前需仔細核對。
三、預(yù)測目標(biāo)因子的濃度
一般來說,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL,病人會顯著增高,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
因而,必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。
若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測動態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。
四、檢查試劑盒進行過哪些質(zhì)控
質(zhì)控數(shù)據(jù)在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴(yán)格的質(zhì)控實驗,包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應(yīng)測試等,每個數(shù)據(jù)最好都看一下,確保chao強的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。
五、確定需檢測的因子數(shù)量
如果待測因子超過 5 個,且樣本量較小時,單因子 ELISA 檢測方法并不是最jia選擇。
建議考慮多因子檢測方法,如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個以內(nèi),檢測指標(biāo)可達上百個)及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80 個,檢測指標(biāo)多達 50 個)或微流控 ELISA 檢測系統(tǒng) Ella。
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