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022-66387942聚乙烯亞胺(PEI)是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳個(gè)原子,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿"(proton sponge)體。PEI,可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(分子量25000)被證明為轉(zhuǎn)染效率zui hao的PEI轉(zhuǎn)染試劑,下面就以PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(貨號(hào):23966-1/23966-100)為例來(lái)說(shuō)明Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的配制過(guò)程。
一、產(chǎn)品特性
CAS No | 9002-98-6, 26913-06-4 | 分子式 | (CH2CH2NH)n |
熔點(diǎn) | 73-75o | 外觀 | 白色或黃色固體 |
溶解性 | 溶于熱水,低 pH 值的冷水,甲醇和乙醇; 不溶于:苯,乙mi和丙酮 | 儲(chǔ)存 | 室溫 |
二、溶液配制
材料:1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(23966-1)、1L 純水、12 M鹽酸、10M氫氧化鈉、一次性 0.1-0.2µm PES 真空無(wú)菌過(guò)濾器、無(wú)菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:1 L 玻璃燒杯、1 L 玻璃量筒、核準(zhǔn) pH 計(jì)、2 支 1 mL 塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵配制過(guò)程:
取1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(23966-1)溶于900ml水中;
加熱到60-80℃并攪拌;
加入HCl,調(diào)節(jié)PH 2.0;
蓋上燒杯,攪拌3h,直到PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(23966-1)粉末wan全溶解為止;
冷卻,直至室溫;
再加入NaOH ,調(diào)節(jié)pH 6.9-7.1;
將調(diào)節(jié)好的溶液移到量筒中,加水至1L;
真空過(guò)濾消毒;
將消毒好的溶液進(jìn)行分裝,分裝好的溶液在-20°C下 保存。
備注:加熱/加酸都有利于 PEI 溶解。加酸的時(shí)候注意用量,多次少量,達(dá)到PEI wan全溶解即可。
試劑儲(chǔ)存:冷凍部分溶液可在-20°C 保存長(zhǎng)達(dá)一年;部分解凍的溶液可在 4°C 保存2 周,注意不可反復(fù)凍融。
粉末儲(chǔ)存:未開(kāi)封的粉末有效期兩年??稍谑覝叵卤4嬷敝潦褂?。